里昂·斯科特·肯尼迪（Leon S Kennedy）
21岁的里昂刚从警校毕业，因对阿克雷山区杀人事件有兴趣而自愿到浣熊市警察局就职，在到职日前一天接到了待命指示，而在自家待命，但此后都未接到局里的联络，对此感到奇怪的他便决定要前往警局。里昂到达的时候，发现城中的警察和市民已经死亡，并且变成了丧尸。
克莱尔·雷德菲尔德（Claire Redfield ）
19岁的克莱尔是个个性活泼大方、好奇心强，喜爱机车的大学生。为了寻找失踪的哥哥克里斯·雷德菲尔德，克莱尔到克里斯隶属的S.T.A.R.S 特殊部队的本部：浣熊市。克莱尔到达的时候，发现城中的人变成了丧尸。当她要被丧尸袭击时，里昂·斯科特·肯尼迪即时出现救她。他们两人决定先到浣熊市警察局中避难。
艾达·王（Ada Wong）
神秘的女间谍。系列大反派阿尔伯特·威斯克派遣她来浣熊市盗取保护伞公司的最新研究成果—G病毒。执行任务时遇上了新人警察里昂，两人因共同患难互相产生好感。
本·贝特鲁奇（Ben Bertolucci）
作为浣熊市新闻社的记者，本挖掘了一些有关警察局长的有趣事实，但在疫情爆发前无法公布。现在，他担心自己的生命，把自己锁在自己能找到的最安全的地方。
雪莉·柏金（Sherry Brikin）
雪莉·柏金是G病毒开发者柏金夫妇的女儿。她在里昂和克莱尔的帮助下终于从犹如地狱的浣熊市逃出。（值得一提的是，1998年原版生化危机2中，雪莉的头发是咖啡色。而在生化危机6中，26岁的雪莉头发颜色是白金色。为了更符合生化危机6的特点，所以在这次的RE2重制版中，雪莉的头发又改为白金色了。
布莱恩·艾隆斯（Biran Irons）
克莱尔·雷德菲尔德逃离城市时遇到的浣熊市警察局局长。他在这些遭遇中的行为清楚地表明，这个人精神错乱，他的行为有一个邪恶的议程。
威廉·柏金（William Brikin）
保护伞公司科学家，G病毒主要开发者。拥有超人的才能，对于病毒有着极其狂热的研究，在与汉克小队的冲突后，自己亲手给自己注射了G病毒，变成了怪物。
亚妮·柏金（Annette Birkin）
保护伞公司科学家。威廉的妻子，雪莉的母亲。虽然表面上是个工作狂，但是内心及其重视家庭。在看到威廉注射病毒后不忍心下手，雪莉感染时也为克莱尔提供办法。后被G第三形态打成重伤，后不幸身亡。
马文?伯拉纳（Marvin Branagh）
马文警长是R.P.D.（浣熊市警察局）的一名警官。当病毒在浣熊市肆虐，他指挥守卫警察局的同事们战斗，带领警员救助幸存者，但最终同事们都被感染变成了丧尸，自己也不幸被变成丧尸的布莱德?维克斯咬伤。最后告诉了里昂如何逃离警察局后死亡。作为警察恪尽职守，不吝生死！
罗伯特·肯多（Robert Kendo)
肯多枪械店的老板。“幽灵生还者”《强忍悲伤》篇主角。他是一名武器专家，负责为浣熊市S.T.A.R.S.部队提供定制型号的装备。他对T病毒爆发的反应是简单地在他的店里坚持，直到外部帮助变得可靠。
汉克（HUNK）
U.S.S一号小队队长，一个生存能力很牛逼的男人。“第四幸存者”模式主角。他率领小队队员回收G病毒，因为某些差错，后导致小队全军覆没。他成功的回收了仅存的G病毒样本，并且逃离了宛如人间地狱般的浣熊市。
幽灵（Ghost）
U.S.S一号小队成员。“幽灵生还者”模式《被遗忘的士兵》篇主角。在幽灵生还者模式中，由他来负责回收G病毒，后在缆车里遇见艾达，疑似被杀。（如果真是被杀那太惨了，主线剧情死了，if剧情也被杀了）
凯瑟琳·沃伦（Catherine Warren）
浣熊市市长迈克·沃伦的女儿，本·贝特鲁奇的女朋友。“幽灵生还者”模式《大逃亡》篇主角。主线剧情中，被布莱恩·艾隆斯杀死，做成标本。在幽灵生还者中，前往R.P.D.，救出了男朋友，与他一起逃离丧尸地狱。